反相C18分離中，水能與許多有機(jī)溶劑混合，如水-甲醇、水-乙腈、水-四氫呋喃等，對(duì)不同的樣品分離結(jié)果也千差萬別。在流動(dòng)相中加入適當(dāng)?shù)母牧紕┤缛野坊蛞宜幔梢砸种乒枘z表面殘留的硅羥基的酸性，從而減少對(duì)酸或堿性組分的保留，減少拖尾；且調(diào)節(jié)流動(dòng)相的PH，對(duì)酸性或堿性組分的選擇性有很大改變。對(duì)于酸性組分來說，當(dāng)流動(dòng)相的PH＜7時(shí)，會(huì)增加在色譜柱上的保留時(shí)間；對(duì)于堿性樣品來說，當(dāng)流動(dòng)相的PH≥7時(shí)，堿性組分為游離型（RNH2），極性小、保留時(shí)間增長(zhǎng)、在固定相與流動(dòng)相之間可以多次分配，增加堿性組分的選擇性。

 

　　C18反相色譜柱適用于質(zhì)量控制及研發(fā)過程中大多數(shù)物質(zhì)的分離。由于采用了*的表面鍵合及封端技術(shù)，有效地限制了堿性，酸性和金屬螯合物質(zhì)的二次相互作用。C18反相柱的固定相是非極性固定相，流動(dòng)相極性大于固定相極性，常用溶劑一般為水和甲醇、四氫呋喃、異丙醇等與水互溶的溶劑，適應(yīng)于分離非極性或弱極性的化合物，其樣品洗脫順序?yàn)闃悠窐O性由高到低。